您是否曾經(jīng)有過(guò)純化的反應(yīng)產(chǎn)物，其應(yīng)該是白色的，純化后仍保留顏色？如果是這樣，您采取了什么措施將其刪除？

例如使用微波反應(yīng)器合成2,4,6-三氯苯胺[1]時(shí)遇到了這種情況，圖1。

圖 1.苯胺與 N-氯代琥珀酰亞胺的微波反應(yīng)。

反應(yīng)產(chǎn)生鐵銹色的粗混合物。 TLC表明產(chǎn)生了產(chǎn)物和一些副產(chǎn)物。使用庚烷和甲基叔丁基醚 (MTBE) 的正相快速色譜看起來(lái)很有前景，但由于反應(yīng)在與庚烷不混溶的乙腈中進(jìn)行，我需要將產(chǎn)物從反應(yīng)溶劑中萃取出來(lái)，并重新溶解在與庚烷兼容的溶劑中例如二氯甲烷（DCM）。萃取還將去除一些極性副產(chǎn)物和過(guò)量的N-氯代琥珀酰亞胺。

用 DCM 萃取后，我添加二氧化硅并蒸發(fā)溶劑以形成干負(fù)載（約 300 毫克）。在提取物純化過(guò)程中，一條非常緊密的鐵銹色條帶穿過(guò)硅膠柱，圖 2。

圖 2.反應(yīng)混合物 DCM 提取物 (300 mg) 的正相快速純化顯示產(chǎn)物以非常緊密、高度著色的條帶洗脫。

該條帶生成了良好的色譜圖，幾乎沒(méi)有分離的副產(chǎn)物，圖 3。

圖 3.使用 0-35% MTBE 的庚烷梯度對(duì) 300 mg 合成 2,4,6-三氯苯胺進(jìn)行正相快速純化。

從300mg上樣量中回收183mg紅色晶體，表明正相去除了大量雜質(zhì)。

那么，產(chǎn)品是純凈的，對(duì)嗎？嗯，不全是。根據(jù)戴維斯的文章，該產(chǎn)品應(yīng)該是“柔軟、無(wú)色的針狀物"，而不是紅色晶體。正如他的文章中所述，為了去除產(chǎn)品中的紅色，他使用了活性炭和二氧化硅，但沒(méi)有提供有關(guān)顏色去除方案的詳細(xì)信息。

我本可以嘗試使用二氧化硅和極性較小的溶劑（例如庚烷）和 DCM 進(jìn)行再純化，但決定使用反相閃蒸來(lái)使用更環(huán)保的解決方案。經(jīng)過(guò)最少的方法開(kāi)發(fā)后，我發(fā)現(xiàn) 60-100% 的甲醇梯度很有希望，圖 4。

圖 4.正相純化產(chǎn)物的反相篩選運(yùn)行。

我將硅膠純化的紅色產(chǎn)物（183 毫克）干燥到 C18 介質(zhì)上，將其裝入干燥上樣容器中，并在 12 克 C18 柱上重新純化。色譜圖顯示分離良好，產(chǎn)物與多種雜質(zhì)分離，圖 5。

圖 5.正相產(chǎn)物餾分的反相快速純化。

收集的級(jí)分表明顏色已從在級(jí)分 2 中洗脫的產(chǎn)物中去除，而有色級(jí)分稍后洗脫，從級(jí)分 4 開(kāi)始，圖 6。

圖 6.反相純化餾分。產(chǎn)物級(jí)分是澄清的并且在級(jí)分2處洗脫，而有色雜質(zhì)稍后在級(jí)分4-7中洗脫。

將級(jí)分 2 中的產(chǎn)物蒸發(fā)，得到 58 mg 柔軟、無(wú)色的針狀物，圖 6。

圖6.2,4,6-三氯苯胺最終產(chǎn)品。

對(duì)于這項(xiàng)工作，我使用了以下設(shè)備：

• Biotage®引發(fā)劑+微波反應(yīng)器

• Biotage® V-10 Touch 溶劑蒸發(fā)器

• Biotage® Selekt Single 快速色譜系統(tǒng)

• Biotage® Sphere HC（10 克）和 C18（12 克）快速色譜柱

• Biotage DLV（干式負(fù)載容器），配備 Biotage® KP-Sil 和 KP-C18-HS
  
  

因此，如果您的產(chǎn)品存在顏色污染，并且之前僅使用硅膠對(duì)其進(jìn)行純化，請(qǐng)考慮通過(guò)反相快速色譜進(jìn)行再純化。與其他技術(shù)相比，它簡(jiǎn)單、容易、更環(huán)保。